Las pipetas son equipos de laboratorio que se utilizan para medir y transferir volúmenes muy pequeños de líquidos. La precisión en las mediciones de la pipeta es muy importante porque las diferencias en el volumen que deja caer la pipeta pueden afectar los resultados experimentales. Para garantizar la precisión, es importante comprobar la calibración de la pipeta cada pocos meses. El proceso de calibración es útil para verificar si este equipo está goteando líquido en el volumen correcto, de modo que se puedan realizar reparaciones si es necesario.
Paso
Parte 1 de 2: Verificación de la calibración
Paso 1. Reúna los materiales necesarios
Para verificar la calibración de la pipeta, lo que se necesita es una pipeta, puntas de pipeta, agua destilada, vaso de precipitados, termómetro, balanza y vaso de pesaje. La balanza utilizada debe estar en escala de microgramos para calibrar la micropipeta con un valor máximo de 1 L.
- No necesitará más de 5 ml de agua. Llena el vaso de precipitados con agua.
- Asegúrese de que la punta de la pipeta sea correcta y encaje perfectamente en la pipeta.
Paso 2. Mida la temperatura del agua destilada
Pon el termómetro en el agua y déjalo reposar durante al menos un minuto. Si la línea roja del termómetro aún se mueve, espere un minuto más. Después de un minuto, registre la temperatura. Toma el termómetro y sécalo cuando hayas terminado.
Es importante conocer la temperatura del agua, ya que se utilizará para los cálculos realizados para verificar la calibración
Paso 3. Coloque la taza de pesaje en la balanza y ponga a cero la balanza
Idealmente, la balanza utilizada tiene una puerta y un espacio aislado en el interior. Coloque la taza de pesaje en la cámara de la balanza y cierre la puerta. Si su balanza no tiene un cubículo y una puerta, simplemente coloque una taza de pesaje en la balanza. Presione el botón "Cero" o "Tara" y espere a que la báscula muestre cero.
Poner a cero la báscula reduce el peso del vaso de plástico y le permite pesar solo el peso de la sustancia colocada en el vaso
Paso 4. Prepare la pipeta para la calibración
Limpie la pipeta con etanol antes de comenzar y asegúrese de que nada esté obstruyendo la punta de la pipeta. Conecte la punta de la pipeta correcta a la punta de la pipeta y determine el volumen a analizar.
Para la calibración, pruebe los volúmenes más pequeños y más grandes que se pueden quitar de la pipeta
Paso 5. Lave la punta de la pipeta antes de calibrarla
Presione el botón hasta el primer límite y sumerja la punta de la pipeta en el agua destilada hasta una profundidad de aproximadamente 2 mm. Suelte el botón para absorber algo del líquido y luego suelte el líquido nuevamente presionando el botón. Repita este paso tres veces para lavar las puntas de los goteros antes de usar.
Presione el botón hasta el segundo límite para eliminar el líquido restante en la punta de la pipeta, luego saque la pipeta del agua
Paso 6. Aspire el volumen de calibración
Con la punta de la pipeta colocada fuera del agua destilada, presione el botón hasta el primer límite. Sumerja la punta de la pipeta a 2 mm de profundidad en el agua destilada y suelte el botón para succionar el líquido en la punta de la pipeta. Espere aproximadamente 1 segundo antes de sacar la punta del gotero del agua.
Asegúrese de que la punta de la pipeta esté completamente sumergida durante el proceso de aspiración. No debe haber burbujas en la punta del gotero o el resultado puede ser incorrecto
Paso 7. Vierta el líquido en el plato de pesaje de la balanza
Coloque la punta de la pipeta en la parte inferior del vaso de pesaje y luego presione el botón de la pipeta hasta el primer límite. Muévase a otro punto, un poco alejado del agua, luego presione el botón hasta el segundo límite. Manteniendo el botón presionado, levante la punta de la pipeta de la taza de pesaje.
Mantenga la punta unida a la pipeta, ya que la volverá a utilizar para otras pruebas de calibración
Paso 8. Registre el peso que se muestra en la balanza
Cierre la puerta de la cabina de equilibrio si está utilizando un equilibrio de puerta. Espere hasta que los números ya no cambien. Escribe en tu cuaderno.
Es importante esperar hasta que los números de la escala no vuelvan a cambiar antes de escribirlos. Las notas saldrán mal si no espera
Paso 9. Repita este proceso para realizar la lectura al menos 10 veces
Ponga a cero la balanza nuevamente, lave las puntas de las pipetas antes de usarlas, aspire el mismo volumen de líquido, retire el volumen y luego registre el peso. Registre el peso del agua destilada para el mismo volumen, luego promedie todas sus notas.
Puede repetir este proceso para diferentes volúmenes si cada volumen se prueba varias veces
Parte 2 de 2: Cálculo del resultado de la calibración
Paso 1. Defina la fórmula para el volumen calculado
La fórmula para calcular el volumen de líquido expulsado por la pipeta es V = w * Z, w es el peso del agua, Z es el factor de conversión basado en la densidad del agua, mientras que V es el volumen de la cantidad de agua. remoto.
- La variable Z se puede obtener calculando la densidad del agua usando la temperatura registrada al comienzo del experimento.
- Por ejemplo: si la temperatura del agua es de 23 ° C, el valor Z es 1,0035 g / mg.
Paso 2. Calcule el promedio general de las calibraciones de la pipeta
El volumen de agua liberado por la pipeta se ha pesado al menos diez veces. Para promediar todos estos valores, súmelos todos y divídalos por 10. Si hizo más o menos del proceso, sume los resultados generales y luego divida por el número de intentos realizados.
- Por ejemplo: el peso del agua de los 10 experimentos que realizó con la pipeta de 10 µL es el siguiente: 9, 89, 10, 01, 10, 02, 9, 99, 9, 95, 10, 04, 9, 96, 10, 01, 9, 99 y 9, 98.
- La media es: (9, 89 + 10, 01 + 10, 02 + 9, 99 + 9, 95+ 10, 04 + 9, 96 + 10, 01 + 9, 99 + 9, 98) / 10 = 99, 84/10 = 9,984
Paso 3. Inserte las variables en la ecuación y resuelva
Una vez que determine el número correcto para cada variable, conéctelo a la fórmula y complete el volumen calculado. Para resolver esta ecuación, simplemente multiplique el peso promedio de todos los ensayos por el valor Z.
Por ejemplo: V = w * Z = 9,984 * 1.0035 = 10, 019
Paso 4. Calcule la precisión de la pipeta
Usa la ecuación A = 100 x Vpromedio/ V0 para calcular la precisión de la pipeta. A indica precisión de la pipeta, Vpromedio es el volumen medio calculado, y V0 es el valor establecido en la pipeta. El valor de precisión debe estar entre 99-101%.
- Si la pipeta está calibrada correctamente, el valor calculado debe estar muy cerca del valor real establecido en la pipeta.
- Por ejemplo: A = 100 x Vpromedio/ V0 = 100 x 10, 019/10 = 100 x 1,0019 = 100,19%
- Esta pipeta está debidamente calibrada.
Paso 5. Si es necesario, envíe la pipeta para su calibración
Si su pipeta no pasa la prueba de calibración, no la use para experimentar en este momento. Las pipetas son equipos de laboratorio muy frágiles y costosos. No puede arreglar la calibración usted mismo, la pipeta debe enviarse para su reparación. Alternativamente, varias empresas acudirán a su laboratorio y calibrarán la pipeta en el lugar.
