Hay muchas formas de medir el crecimiento bacteriano, y una es más complicada que la otra. Aunque a veces se debe ignorar la consistencia de la medición, la forma más fácil es suficiente para medir el crecimiento bacteriano con precisión, por lo que se usa con frecuencia. Los métodos más utilizados son el seguimiento y recuento de bacterias, la medición de masa seca o húmeda y la medición de turbidez / niveles de turbidez. El laboratorio de su escuela debe tener las herramientas y el equipo necesarios para realizar al menos uno de estos experimentos.
Paso
Método 1 de 3: Monitoreo de bacterias vivas
Paso 1. Prepare los ingredientes
Hay muchas herramientas especiales que deben prepararse y es posible que no estén disponibles en un laboratorio de biología. Prepare todo el equipo y los contenedores antes de ejecutar el experimento para que no haya problemas durante el proceso. Necesitará conocer cada ingrediente que se usa de inmediato y los términos básicos de este experimento.
- Prepare la cámara de recuento. Tiene una cámara, un microscopio y un microscopio integrados, por lo que es fácil de configurar y usar. Puede comprarlo en un laboratorio o en una tienda de útiles escolares. Esta herramienta debe tener instrucciones que lo guíen a lo largo de todo el proceso.
- Prepare una taza para verter o una taza para untar. Ambos contenedores le permiten controlar las bacterias en el interior.
- Cultura es un término que se usa para describir el crecimiento de organismos en un experimento.
- El caldo es un medio líquido en el que crece el cultivo.
Paso 2. Utilice el método de plato de vertido o plato de extensión
También puede colocar las bacterias directamente en el plato para verlas con un microscopio. Vierta el cultivo en un platillo y colóquelo bajo el microscopio. Controle la cantidad de células bacterianas presentes.
Paso 3. Asegúrese de que la dosis de concentración sea la correcta
Si hay demasiadas, las bacterias se acumularán unas sobre otras y es posible que calcule mal. Diluir el cultivo mezclando más caldo. Si hay muy pocos, los resultados del cálculo no serán precisos. Cuela el caldo usando un sistema de filtración.
Paso 4. Cuente las bacterias
El último paso es contar las bacterias una por una. Mire a través de la lupa en la cámara de conteo y anote la cantidad de bacterias que ve. Compare los resultados con los resultados de otras pruebas.
Método 2 de 3: Medición de masa seca y húmeda
Paso 1. Asegúrese de tener el equipo adecuado
Este método utiliza equipos costosos y mucho tiempo. Si su laboratorio no tiene el equipo que necesita, es una buena idea utilizar otro método. Sin embargo, si su laboratorio está lo suficientemente bien equipado, le recomendamos este método, ya que proporciona resultados más consistentes. En este método, necesitará:
- Horno hidráulico de convección por gravedad
- Recipiente de pesaje de aluminio
- Un juego de matraces (frascos de laboratorio)
- Máquina centrífuga (centrífuga) o sistema de filtración de laboratorio
Paso 2. Asegúrese de que el cultivo esté en el matraz
Agrega la cultura a la calabaza. En esta etapa, el cultivo debe ser un caldo, aunque posteriormente se volverá a separar.
Paso 3. Seque el recipiente de pesaje de aluminio en el horno de laboratorio
En su lugar, puede utilizar una membrana de filtro de acetato de celulosa con un diámetro de 47 mm y un tamaño de poro de 0,45 µm. Independientemente del recipiente de pesaje que utilice, péselo, ya que será necesario deducirlo más adelante al pesar las células bacterianas.
Paso 4. Agite el cultivo en el matraz hasta que se mezcle uniformemente
La celda se hundirá naturalmente debido a la gravedad y será necesario agitarla para esparcirla uniformemente en el matraz. De esa forma, puede tener más muestras.
Paso 5. Utilice una centrífuga para separar las células bacterianas del caldo
Esta herramienta hace girar el matraz y se equilibra rápidamente para que drene el caldo y deje el cultivo en el matraz.
Paso 6. Raspe la pasta de la calabaza y colóquela en un recipiente para pesar
Deseche el caldo porque ya no lo necesita. Sin embargo, no se deshaga de la calabaza todavía porque todavía se usará.
Paso 7. Enjuague la máquina centrífuga y vierta el agua de enjuague en el recipiente
Deje caer el agua de enjuague del matraz sobre las células bacterianas para obtener el peso húmedo.
Paso 8. Encuentre el peso seco
Para medir el peso seco, colocar el recipiente en el horno y secar a 100ºC durante 6-24 horas según las instrucciones del horno y / o recipiente de pesaje utilizado. Asegúrese de que la temperatura no sea demasiado alta para que las bacterias no se quemen. Pese las bacterias cuando haya terminado y no olvide reducir el resultado por el peso del recipiente de pesaje.
Método 3 de 3: Medición de la turbidez
Paso 1. Prepare el equipo necesario
Necesitará una fuente de luz y un espectrofotómetro. Ambos se pueden obtener en las tiendas de suministros de laboratorio. El espectrofotómetro debe tener instrucciones que lo guiarán en el uso del instrumento de acuerdo con el modelo que tenga. El precio del espectrofotómetro es bastante asequible y fácil de usar, por lo que puede convertirse en uno de los métodos más utilizados para medir el crecimiento bacteriano.
Paso 2. Encienda la muestra
Según el término de Layman, la turbidez es el nivel de turbidez de una muestra. Debe obtener el número de medición de turbidez, que se mide en NTU (Unidad de turbidez nefelométrica). Esta herramienta debe calibrarse antes de poder medir la muestra con precisión.
Paso 3. Registre los resultados
La turbidez se ve afectada por la cantidad de bacterias en la muestra. El espectrofotómetro también le dirá el porcentaje de transmisión (% T). Esta cifra aumentará si la turbidez disminuye. Compare los resultados con los resultados de otras pruebas para medir el crecimiento bacteriano.
Advertencia
- Dado que se trata de una colonia de bacterias, tome precauciones y use equipo de seguridad, como gafas y guantes de seguridad. También es una buena idea usar una mascarilla, especialmente si no conoce el tipo de bacteria que se está estudiando.
- Tome precauciones antes de manipular cualquier tipo de bacteria, incluso las inofensivas. Asegúrese de que todas las heridas abiertas de su cuerpo estén completamente cubiertas antes de comenzar.
